在單細胞水平上，通過光鏡定性檢測細胞凋亡。

• 敏感：細胞凋亡（細胞染色）標簽的大強度高于缺口翻譯方法
• 快速：使用熒光的dUTP允許后直接TUNEL反應，但在此之前的二次檢測系統除了對樣品的分析
• 方便：直接標記程序，使用熒光素-dUTP標記允許在檢測過程中的TUNEL反應效率的核查
• 準確：在分子水平（DNA鏈斷裂）和細胞凋亡的早期階段的細胞識別凋亡鑒定
• 靈活：無基板;提供了選擇的機會，選擇染色過程

樣品材料：細胞離心涂片和細胞涂片準備，在幻燈片上生長的貼壁細胞，冷凍和石蠟包埋的組織切片。

廣泛使用的方法，以確定細胞凋亡的基因組DNA的瓊脂糖凝膠電泳和DNA段分析基于分析3 H -胸苷，另外，5 -溴-2'-脫氧尿苷。該方法涉及從零散，低分子量的DNA不分段，高分子量的DNA分離在一個特定的細胞群。因此，這些方法并不在一個特定的細胞群提供單個細胞的命運的信息，特別是在組織切片。另外，個別細胞凋亡可能顯微鏡確認，因為核染色質凝聚和碎裂的外觀特征，但這種方法是主觀的，不限于一個相對狹窄的時間窗口時的形態學變化大的是細胞凋亡的特點是DNA降解，這是有選擇性的DNA鏈接的internucleosomal地區處于早期階段。可能產生DNA斷裂雙鏈和單鏈DNA斷裂（尼克斯）。兩種類型的休息可以自由3'-OH末端修飾核苷酸標記（例如在酶催化反應，生物素-dUTP標記，地高辛-dUTP標記，熒光的dUTP）檢測。末端轉移酶（TDT）催化脫氧模板獨立聚合單和雙鏈DNA的3'-末端。這種方法也被稱為TUNEL法（牛逼 ð ü DT-介導的TP-X的列印 ICK é ND 升abeling）。另外，自由3'-OH基團，可使用DNA聚合酶標記通過名為尼克翻譯的模板依賴的機制。然而，TUNEL法被認為是更敏感和更快捷。

1. 酶液（TDT），5瓶
2. 標簽解決方案（熒光的dUTP），5瓶
3. 轉換器AP（反熒光抗體AP），準備使用的

在原位細胞凋亡檢測試劑盒，AP是基于檢測單和雙鏈DNA斷裂，細胞凋亡的早期階段發生的
細胞凋亡是固定的，透。隨后，細胞培養與TUNEL反應混合物，其中包含TDT和熒光的dUTP。在此潛伏期，末端轉移酶催化熒光的dUTP除了免費單和雙鏈DNA的3'-OH組。洗滌后，記者酶堿性磷酸酶共軛反熒光抗體標記的DNA受損部位納入標簽。洗滌除去未結合的酶標記物后，AP保留在免疫復合物是由底物反應的可視化。

圖1： 示意圖顯示喔那些點點滴滴在原位細胞死亡檢測試劑盒，AP和POD 的原則