胞核/胞漿蛋白分離提取實(shí)驗(yàn)小貼士（二）

Solarbio EX2652-Ultra胞漿/胞核蛋白提取試劑盒優(yōu)勢(shì)

1.提取效率高

1）操作簡便：提供了一種簡單、方便的從培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織中提取胞漿/胞核蛋白的方法。

2）提取快速：能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成胞漿/胞核蛋白的提取。

2. 提取純度高

試劑盒中含有特殊的非離子型去污劑以及蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制試劑等成分，能夠在非變性和低滲的條件下裂解細(xì)胞，去除大部分膜蛋白，釋放完整的細(xì)胞核，從而提高胞漿/胞核蛋白的純度。

3.適用范圍廣

1）樣本類型多樣：適用于多種樣本類型，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、新鮮組織等。

2）下游應(yīng)用廣泛：提取的核蛋白可用于多種下游實(shí)驗(yàn)，如Western Blot、免疫共沉淀、EMSA、轉(zhuǎn)錄因子活性分析、酶活性測(cè)定等。

4.保持蛋白活性

1）活性維持：在提取過程中，試劑盒的配方能夠保持胞漿/胞核蛋白的天然活性。

2）抑制降解：試劑盒中含有蛋白酶抑制劑混合物，可有效阻止蛋白酶對(duì)蛋白的降解，從而保證提取的蛋白具有較高的活性。

5.安全性

低毒試劑配方，沒有添加有毒試劑，采用溫和去垢劑和無放射性成分，保障實(shí)驗(yàn)人員安全。

組織實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別取等量的60mg組織，使用3種不同的試劑盒——A Company、B Company、Solarbio按照各自說明書進(jìn)行胞漿胞核蛋白提取，使用5種不同的細(xì)胞核蛋白抗體進(jìn)行WB檢測(cè)，以核蛋白為檢測(cè)指標(biāo)的WB檢測(cè)結(jié)果如圖1所示。

結(jié)果表明，Solarbio的檢測(cè)結(jié)果優(yōu)于國產(chǎn)A Company、國產(chǎn)B Company尤其是Histone H3、Histone H2A.X和Histone H3.1。

此外，我們使用LDHA細(xì)胞漿蛋白抗體進(jìn)行WB檢測(cè)，以漿蛋白為檢測(cè)指標(biāo)的WB檢測(cè)結(jié)果如圖1所示。

結(jié)果表明，三種試劑盒的胞漿蛋白提取效果相當(dāng)，且核質(zhì)分離效果明顯，交叉污染率極低。

圖1 不同試劑盒的核漿標(biāo)志性抗體WB檢測(cè)結(jié)果

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別取等量的（2×10⁶個(gè)）HEK 293T細(xì)胞，使用3種不同的試劑盒——A Company、B Company、Solarbio按照各自說明書進(jìn)行胞漿胞核蛋白提取，使用3種不同的細(xì)胞核蛋白抗體進(jìn)行WB檢測(cè)，以核蛋白為檢測(cè)指標(biāo)的WB檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。

結(jié)果表明，Solarbio的檢測(cè)結(jié)果優(yōu)于Company、B Company（尤其是LMNB2、Lamin B1）；Histone H3檢測(cè)結(jié)果相近，效果相當(dāng)，對(duì)于漿蛋白中的污染情況三種試劑盒均出現(xiàn)，其中Solarbio的胞漿蛋白污染，效果低于A Company、B Company。

此外，我們使用LDHA細(xì)胞漿蛋白抗體、VDAC線粒體蛋白抗體進(jìn)行WB檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)的WB檢測(cè)結(jié)果如圖2所示。

結(jié)果表明，Solarbio、B Company兩種試劑盒的胞漿蛋白提取效果相當(dāng)，均優(yōu)于A Company，且核質(zhì)分離效果明顯，交叉污染率極低。

圖2 不同試劑盒的核漿標(biāo)志性抗體WB檢測(cè)結(jié)果

總結(jié)

與A Company、B Company相比，Solarbio提取的核蛋白WB效果明顯，核質(zhì)交叉污染率低，且適用于IP、EMSA、Footprinting等其它實(shí)驗(yàn)，所以客戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇對(duì)應(yīng)的試劑盒。

此外，Solarbio已推出精品抗體活動(dòng)，本實(shí)驗(yàn)中所使用的抗體均為Solarbio研發(fā)的精品抗體，詳情見表1，歡迎客戶選購。

實(shí)驗(yàn)所用Solarbio精品抗體貨號(hào)與名稱

Solarbio Ultra系列蛋白提取試劑盒相關(guān)產(chǎn)品